Qubit 4.0熒光計(jì)是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高靈敏度、高特異性的定量儀器，專用于精確測量DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度。以下是其核心特點(diǎn)和使用方法的總結(jié)：

一、適用檢測類型

1、核酸定量

DNA：dsDNA（雙鏈）、ssDNA（單鏈）、microRNA、小片段DNA（如NGS文庫）。

RNA：總RNA、mRNA等。

靈敏度：可檢測低至0.5 pg/μL（高靈敏度試劑）至100 ng/μL（寬范圍試劑）。

二、蛋白質(zhì)定量

兼容多種熒光染料（如Qubit Protein Assay Kit），適合低濃度樣本（0.05–5 mg/mL）。

三、Qubit4.0熒光計(jì)核心優(yōu)勢

1、高特異性：熒光染料僅結(jié)合目標(biāo)分子（如dsDNA），避免污染物（如鹽、游離核苷酸）干擾。

2、高靈敏度：比紫外分光光度法（Nanodrop）更準(zhǔn)確，尤其適用于低濃度或復(fù)雜樣本。

3、操作簡便：觸摸屏界面，預(yù)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，無需用戶校準(zhǔn)。

四、操作步驟

1、試劑準(zhǔn)備

選擇對(duì)應(yīng)的檢測試劑盒（如Qubit dsDNA HS Assay Kit）。

將熒光染料與緩沖液按比例混合，配制工作液。

2、標(biāo)準(zhǔn)品檢測

使用試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品（通常2個(gè)濃度點(diǎn)）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3、樣本檢測

將1–20 μL樣本與工作液混合，室溫孵育2–5分鐘。

插入Qubit 4.0，選擇對(duì)應(yīng)檢測程序，讀取濃度。

4、數(shù)據(jù)分析

儀器自動(dòng)計(jì)算濃度，結(jié)果可直接導(dǎo)出或保存。

五、注意事項(xiàng)

1、樣本體積：推薦使用1–20 μL，濃度需在試劑檢測范圍內(nèi)。

2、避免污染：手套操作，防止RNase/DNase污染（核酸檢測時(shí)）。

3、染料特異性：不同分子需匹配專用染料（如RNA檢測不可用dsDNA染料）。

4、動(dòng)態(tài)范圍：超出范圍時(shí)需稀釋或換用寬范圍試劑。